內酰胺酶檢測主要是針對治療感染性疾病藥物的檢測，這類藥物都具有抗菌活性部分--β-內酰胺環，這種酶是耐藥細菌針對內酰胺類抗生素分泌的的，可以與β-內酰胺環結合，使β-內酰胺環裂解而被破壞，失去抗菌活性。
 

　　內酰胺酶檢測主要就是檢測內酰胺酶是否具有活性，其常用的方法有頭孢菌素顯色、酸定量、碘測量方法，及頭孢菌素酶、β酰胺酶和P/C測定藥盒法。β內酰胺酶破壞β內酰胺抗生素的β內酰胺環有兩種作用機制。
 

　　一、大多數常見的β內酰胺酶有一個依賴絲氨酸發揮作用的機制，并且根據氨基酸序列組成分為三類(A，C和D)。通常它們的活性位點具有一個狹窄的縱形溝狀結構，在溝的底部形成了一個空腔(氧陰離子袋)，這種疏松的構造容易彎曲，便于結合底物。由于β內酰胺環上的羰基碳在結合β內酰胺酶活性部位的絲氨酸時發生了不可逆的反應，結果使其成為開環物，進而重建了β內酰胺酶。這類酶對青霉素、頭孢菌素、單內酰環類抗生素都有活性。
 

　　二、是一類不大多見的β內酰胺酶，被稱為金屬類β內酰胺酶，或B類β內酰胺酶。它們的特點是利用一個2價金屬離子，絕大多數為鋅離子，分別與組氨酸或半胱氨酸結合，或同時與二者結合，并與β內酰胺類抗生素的羰基碳的酰胺鍵相互作用，使其不能發揮作用。這類酶主要對青霉素、頭孢菌素、碳青酶烯類抗生素發揮作用，但對單內酰環類抗生素無效。